Le soluzioni ipotoniche di Cloruro di Potassio e Sodio Citrato sono le più utilizzate nel processo di cariotipizzazione. Possono essere utilizzate sia a temperatura ambiente che a 37°C. Generalmente una temperatura più elevata favorisce una maggiore espansione delle metafasi. Il tempo di incubazione dipende dalla densità cellulare e dal tipo di campione, vetrino o pellet. Normalmente il tipo di trattamento ipotonico viene determinato empiricamente in ogni laboratorio e potrebbe aver bisogno di alcune modifiche di volta in volta.